La citometria de flux és una tecnologia que permet analitzar cèl·lules, partícules o microorganismes que es trobin en suspensió. Els citòmetres de flux utilitzen làsers com a font d’excitació de llum, per tant, ha de ser possible marcar les partícules amb una o més substàncies fluorescents. Així mateix, es recull informació sobre la grandària i la complexitat estructural de cada partícula. Aquest estudi multiparamètric permet analitzar subpoblacions en mostres complexes.
La plataforma de citometria de l’IISPV, de recent creació, proporciona als investigadors de la institució, així com a cossos externs, assessoria técnico-científica per a desenvolupar assajos de citometria de flux fiables i que compleixin amb els estàndards de qualitat actuals.
Amb el suport de:
Adquisició i Anàlisi: Estudi de cèl·lules o partícules en funció de les característiques fluorescents o de dispersió de la llum. Dins dels serveis d’adquisició oferts es troben:
Separació Cel·lular: La UCF compta amb el FACS Ària III, un citòmetre analitzador i separador que permet separar cèl·lules o partícules en funció de paràmetres prèviament definits per l’operador.
Assessoria i disseny experimental: La UCF ofereix assessoria als usuaris al disseny experimental, prèvia sol·licitud de l’investigador principal i segons disponibilitat del personal de la Unitat.
Autoservei: El règim d’autoservei és considerat només per a usuaris avançats, prèviament entrenats i autoritzats per la UCF.
Formació: La plataforma de Citometria de l’IISPV ha iniciat una sèrie de cursos de formació destinats a estudiants de cicle formatiu superior i universitaris, específicament dins de la URV.
Anàlisi de resultats: La plataforma de Citometria posa a la disposició dels usuaris una llicència del programa d’anàlisi FlowJo, la qual permet l’anàlisi offline dels resultats. A més, als equips FACS Aria III i Cytek Northern Lights es troben, els programaris d’anàlisi BD FACS DIVA™ i SpectroFlo, respectivament.
Citòmetres de flux analitzadors
Citòmetre de flux separador (Sorter)
Sistemes de caracterització de nanopartícules
Altres sistemes de separació cel·lular
Recursos complementaris de laboratori
Citòmetre de flux analitzador i separador FACSAria III (BD Biosciences)
El FACSAria III (BD) és un citòmetre de flux d’alta velocitat que combina l’anàlisi multiparamètrica amb la capacitat de separació cel·lular (cell sorting). Està equipat amb tres làsers:
(Vegeu: Configuració de l’equip).
Permet analitzar fins a 16 paràmetres: 14 canals de fluorescència, juntament amb la mida cel·lular (FSC) i la complexitat interna (SSC). La pressió de treball és ajustable en funció de la mida i el tipus cel·lular, fet que permet una separació optimitzada.
Les cèl·lules separades es poden recollir en tubs de 1,5 mL, 5 mL o 15 mL, amb fins a quatre rutes de recollida independents, fet que el fa ideal per a estudis que requereixen alta puresa i viabilitat cel·lular.
Citòmetre de flux espectral Northern Lights (Cytek®)
El Northern Lights (Cytek®) és un citòmetre de flux basat en tecnologia espectral, que permet una major resolució i flexibilitat en el disseny de panells multicolor.
Disposa de tres làsers:
Està configurat amb 41 detectors i pot captar fins a 38 canals espectrals. A diferència de la citometria convencional, aquest equip registra tot l’espectre d’emissió de cada fluorocrom, generant una signatura espectral única per a cada marcador.
Aquesta tecnologia millora significativament la identificació de poblacions cel·lulars complexes, especialment en mostres amb alta autofluorescència o en panells d’alta dimensionalitat.
Analitzador de nanopartícules NSPro (IESMAT – NTA)
El NSPro (IESMAT) és un equip avançat d’anàlisi basat en la tecnologia de Nanoparticle Tracking Analysis (NTA), dissenyat per a la caracterització precisa de partícules en suspensió amb mides compreses entre 10 nm i 2 μm. Aquest rang inclou vesícules extracel·lulars, exosomes, virus i nanopartícules sintètiques.
L’equip utilitza un làser per il·luminar la mostra i una càmera d’alta sensibilitat que captura en temps real el moviment brownià de les partícules. A partir de la velocitat de desplaçament individual, es calcula la mida i la concentració de les partícules segons l’equació de Stokes–Einstein.
El sistema compta amb un mòdul de fluorescència equipat amb filtres long pass i làsers excitadors de 405 nm, 488 nm , 532 nm i 642 nm, que permet treballar amb un fluorocrom o sonda fluorescent per experiment. Aquesta configuració és adequada per a estudis de partícules marcades, com vesícules extracel·lulars o nanopartícules funcionalitzades.
Aquesta tecnologia permet obtenir informació detallada sobre la distribució i la concentració de partícules, facilitant la caracterització de partícules de petit tamany, amb aplicacions en el camp de la nanomedicina, la biologia cel·lular i el desenvolupament de teràpies avançades.
Erika Scholz, PhD. Responsable de la Plataforma.
A/e: erika.scholz@iispv.cat
Orcid: https://orcid.org/0000-0002-7589-0517
Oficina tècnica IISPV / Planta 7 del Hospital Universitari Joan XXIII
Institut d’Investigació Sanitària Pere Virgili (IISPV)
Hospital Universitari Joan XXIII C/ Doctor Mallafrè Guasch, 4
43005 Tarragona
A/e: citometria@iispv.cat
Telèfon: +34 977 297 996
La Plataforma de Cultius Cel·lulars és una unitat de suport tècnic i científic que ofereix suport als grups de recerca, tant interns com externs a l'IISPV, posant a la seva disposició les instal·lacions i els equipaments apropiats per al cultiu, manteniment i execució de bioassajos amb cèl·lules eucariotes.
La Plataforma de Suport Estadístic és una plataforma transversal de suport estadístic a l’investigador que ofereix un servei de suport i assessorament en totes les fases del desenvolupament d’un projecte de recerca: metodologia, disseny, anàlisi i publicació.
La Direcció Clínica de Farmàcia és un servei central de suport clínic amb activitats pròpies i de suport a la resta de serveis assistencials del ICS Camp de Tarragona.
Servei de bioinformàtica a disposició de tots els professionals de l'IISPV.
La Plataforma de Cultius Cel·lulars és una unitat de suport tècnic i científic que ofereix suport als grups de recerca, tant interns com externs a l'IISPV, posant a la seva disposició les instal·lacions i els equipaments apropiats per al cultiu, manteniment i execució de bioassajos amb cèl·lules eucariotes.
La Plataforma de Suport Estadístic és una plataforma transversal de suport estadístic a l’investigador que ofereix un servei de suport i assessorament en totes les fases del desenvolupament d’un projecte de recerca: metodologia, disseny, anàlisi i publicació.
La Direcció Clínica de Farmàcia és un servei central de suport clínic amb activitats pròpies i de suport a la resta de serveis assistencials del ICS Camp de Tarragona.
Servei de bioinformàtica a disposició de tots els professionals de l'IISPV.
