Plataforma de Citometría y Separación Celular

Plataforma de Citometría y Separación Celular

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La citometría de flujo es una tecnología que permite analizar células, partículas o microorganismos que se encuentren en suspensión. Los citómetros de flujo utilizan láseres como fuente de excitación de luz, por lo tanto, debe ser posible marcar las partículas con una o más sustancias fluorescentes. Así mismo, se recoge información sobre el tamaño y la complejidad estructural de cada partícula. Este estudio multiparamétrico permite analizar subpoblaciones en muestras complejas.

La plataforma de citometría del IISPV, de reciente creación, proporciona a los investigadores de la institución, así como a entes externos, asesoría técnico-científica para desarrollar ensayos de citometría de flujo fiables y que cumplan con los estándares de calidad actuales.

Con el apoyo de:

  • 01

    Adquisición y Análisis: Estudio de células o partículas en función de sus características fluorescentes o de dispersión de la luz. Dentro de los servicios de adquisición ofrecidos se encuentran:

    • – Inmunofenotipado
    • – Ensayos de viabilidad celular
    • – Análisis de apoptosis y ciclo celular
    • – Estudio de la activación y función mitocondrial
    • – Expresión de proteínas fluorescentes
    • – Análisis multiparamétrico de moléculas en soluciones líquidas (citoquinas)
  • 02

    Separación Celular: La UCF cuenta con el FACS Aria III, un citómetro analizador y separador que permite separar células o partículas en función de parámetros previamente definidos por el operador.

  • 03

    Asesoría y diseño experimental: La UCF ofrece asesoría a los usuarios en el diseño experimental, previa solicitud del investigador principal y según disponibilidad del personal de la Unidad.

  • 04

    Autoservicio: El régimen de autoservicio es considerado solo para usuarios avanzados, previamente entrenados y autorizados por la UCF.

  • 05

    Formación: La plataforma de Citometría del IISPV ha iniciado una serie de cursos de formación destinados a estudiantes de ciclo formativo superior y universitarios, específicamente dentro de la URV.

  • 06

    Análisis de Resultados: La plataforma de Citometría pone a disposición de los usuarios una licencia del programa de análisis FlowJo, la cual permite el análisis offline de los resultados. Además, en los equipos FACS Aria III y Cytek Northern Lights se encuentran, los softwares de análisis BD FACS DIVA™ y SpectroFlo, respectivamente.

· Citómetros de flujo analizadores:

  • – FACS Ària III (BD)
  • – Northern Lights (Cytek)

 

· Citómetro de flujo separador (Sorter):

  • – FACS Ària III (BD)

 

· Separador celular magnético autoMACS.

· Vórtex, pipetas y nevera.

 

  • 01

    Citómetro de Flujo Analizador y Separador FACS Aria III (BD)

    El FACS Aria III (BD) es un citómetro de flujo analizador y separador de partículas y células de alta velocidad y resolución. Está configurado con 3 láseres (violeta 405nm, azul 488 nm y rojo 633nm) con capacidad para analizar 16 parámetros en total: 14 fluorescencias más tamaño (FSC) y complejidad (SSC) (ver: Configuración equipo).

    Permite el uso de diferentes presiones en función del tamaño y del tipo celular a separar. Una vez separadas, las células se pueden recoger en tubos de 1,5 mL, 5 mL y 15 mL. La separación se puede llevar a cabo en tubos de 1,5 mL, 5 mL y 15 mL.

    Figura 1. FACS Aria III (BD Biosciences)
  • 02

    Citómetro de Flujo Analizador con tecnología espectral Northern Lights (Cytek)

    El Northern Lights (Cytek) es un citómetro de flujo con 3 láseres (violeta 405nm, azul 488nm y rojo 638nm), 41 detectores y 38 canales de fluorescencia. Este equipo de tecnología espectral, permite recoger toda la emisión de luz emitida por cada fluorocromo, obteniendo así la firma espectral, que es la suma de las diferentes huellas espectrales unidas. De esta manera, permite una mayor flexibilidad en el diseño de paneles de anticuerpos y una mayor capacidad de resolución de poblaciones celulares.

    Figura 2. Northern Lights (Cytek)

Erika Scholz, PhD. Responsable de la Plataforma.
A/e: erika.scholz@iispv.cat
https://orcid.org/0000-0002-7589-0517

 

Pilar Gutiérrez Ventas
A/e: pilar.gutierrez@iispv.cat
https://orcid.org/0000-0002-4761-4478

Oficina técnica IISPV / Planta 7 del Hospital Universitario Joan XXIII

Institut d’Investigació Sanitària Pere Virgili (IISPV)

Hospital Universitari Joan XXIII C/ Doctor Mallafrè Guasch, 4

43005 Tarragona

A/e: citometria@iispv.cat

Telèfon: +34 977 297 996